US=494 / Tese/FAP
Torrezan GT. Identificação de mutações nos genes APC e MUTYH em famílias com polipose adenomatosa intestinal. [Mutational screening of APC and MUTYH genes in families with adenomatous polyposis]. São Paulo, 2014. 117 p. Tese(Doutorado)-Fundação Antonio Prudente.
Resumo:
Atualmente, pacientes com múltiplos adenomas colorretais são avaliados para mutações germinativas em dois genes, APC e MUTYH. Pacientes com mutações em APC apresentam Polipose Adenomatosa Familiar Clássica ou Atenuada (FAP/AFAP), enquanto que pacientes portadores de mutações bialélicas em MUTYH apresentam Polipose Associada ao MUTYH (MAP). O espectro das mutações em APC e MUTYH, assim como as correlações genótipo-fenótipo nestas síndromes, apresentam importante impacto clínico e podem ser distintas em cada população, tornando necessária a obtenção de dados genéticos e clínicos de diferentes populações. Além disso, cerca de 10-15% dos pacientes com polipose não apresentam mutações nesses genes, o que sugere a existência de outros genes de predisposição ainda desconhecidos. Assim, os objetivos deste estudo foram caracterizar mutações germinativas nos genes APC e MUTYH em pacientes Brasileiros com polipose, além de identificar novos genes associados com a síndrome através de sequenciamento de exoma dos pacientes negativos. No total, 23 pacientes não relacionados foram avaliados para mutações pontuais na região codificante dos genes APC e MUTYH através de sequenciamento capilar, e para rearranjos genômicos nos mesmos genes por meio de MLPA (Multiplex Ligation-Dependent Probe Amplification), arrays de hibridação genômica comparativa (CGH-array), e PCR duplex quantitativo. Este último método de avaliação do número de cópias genômicas foi desenvolvido e validado no presente estudo. Foram identificados 21 pacientes mutados nesta coorte (91%) - 6 pacientes apresentaram mutações patogênicas em MUTYH, 14 apresentaram mutações patogênicas em APC e um paciente foi portador de uma nova variante missense de significado clínico desconhecido em APC (p.Val1789Leu); seis mutações foram descritas pela primeira vez neste trabalho. Em um destes pacientes identificamos a primeira grande deleção genômica descrita no gene MUTYH. Correlações genótipo-fenótipo dos dados clínicos dos probandos e seus familiares (totalizando 113 indivíduos afetados) revelaram resultados divergentes em comparação com os descritos em outros estudos, especialmente em relação à ocorrência de tumores desmóides em famílias com mutações antes códon 1444 (6/8 famílias com desmóides). Dois pacientes não apresentaram mutações em nenhum dos genes avaliados e foram investigados para mutações em outros genes através do sequenciamento completo do exoma na plataforma SOLiD 5500XL. Foi identificada em um desses pacientes uma alteração nova em um gene da família das polimerases, cuja principal função é o reparo de DNA, não presente em bancos de dados e nem em população controle Brasileira. Análises de segregação e experimentos funcionais serão realizados para verificar a associação deste e de outros candidatos selecionados com o fenótipo de polipose. Esta primeira investigação abrangente do espectro mutacional dos genes APC e MUTYH em pacientes com polipose brasileiros mostrou uma alta taxa de detecção e identificou novas mutações patogênicas. Notavelmente, um número significativo de famílias com mutação em APC não foram consistentes com as correlações genótipo-fenótipo previstos de outras populações.
Notas de conteúdo: